Transmisibilidad de aislamiento del Citrus Tristeza Virus (CTV) por áfidos y evaluación de la resistencia en cítricos tranformados con genes del CTV

Abstract

La sintomatología en árboles infectados por el Citrus Tristeza Virus (CTV) es influenciada por factores como la población de variantes de secuencia presentes. Esta población es modificada en la transmisión por áfidos y la evidencia sugiere que la interacción del CTV con Toxoptera citricida, incrementa la frecuencia de los aislamientos severos. Se estudió una huerta en Yucatán con una incidencia inicial de 11 árboles positivos a CTV y con tres haplotipos de aislamientos no severos, se caracterizaron los aislamientos presentes en los nuevos árboles positivos y de manera simultánea los presentes en el vector predominante (T. citricida). Después de tres años, la incidencia aumentó a 75 árboles positivos, los nuevos positivos generalmente fueron del haplotipo uno, sin evidencia del surgimiento de aislamientos severos al caracterizar mediante métodos moleculares. Para el manejo de la tristeza de los cítricos se han recurrido a patrones tolerantes que no poseen la misma plasticidad que C. aurantium o protección cruzada que puede ser rebasada por el surgimiento de variantes más severas. La generación de plantas transgénicas que integran una porción del genoma del virus parece ser una alternativa para el control de algunos virus. Se evaluó la resistencia obtenida en plantas de pomelo y limón mexicano modificadas vía Agrobacterium con el gen p25 del CTV, inoculadas por injerto y Aphis gossypii en las cuales se midió la concentración de copias de RNA mediante PCR en tiempo real. Los resultados en invernadero como en condiciones in vitro, indican que las plantas modificadas tuvieron un menor número de copias de RNA que sus contrapartes sin modificar. La transmisión por áfidos no fue eficiente y no permitió evaluar grupo de plantas, aún cuando en los áfidos se detectaron moléculas de RNA del virus, principalmente en los alimentados en plantas con el aislamiento severo. _______Symptomatology in CTV infected trees is influenced by factors like haplotype populations or sequence variants present. In nature, this population is modified principally by aphid transmission. Up to date evidence shows that in CTV-brown citrus aphid (T. citricida) interaction, severe isolates are more prevalent. In this work, a citrus tree orchard in Yucatán, with an inicial incidence of 11 CTV positive trees was characterized. No severe isolates were detected and only three haplotypes were found, simultaneously haplotypes present in the main vector (T. citricida) were analyzed. In three years, incidence increased to 75 positive trees, new positives ones, generally contained haplotype one and no severe isolates were detected by molecular detection. These results were similar in greenhouse controlled transmission by Aphis gossypii. Citrus tristeza disease management has been performed by using tolerant rootstocks or cross protection with mild isolates. However, CTV tolerant rootstocks do not have the C. aurantium plasticity and cross protection has been overpassed by more severe isolates. A successful alternative used against some viral diseases are genetically modified plants which integrate a portion of virus genome. We evaluated conferred resistance in Mexican lime and grapefruit modified with CTV p25 gene, inoculated by graft and A. gossypii. In these plants, genome RNA copies were recorded trought real time PCR. Results obtained in greenhouse and in vitro conditions were similar, genetically modified plants present a minor number of RNA copies than the wild type. Aphid transmission was not efficient, so this group was not evaluated even when viral RNA was detected in aphids, especially in those established in plants infected with severe isolates.